把水样或经过预处理水样注入培养瓶内，同时在瓶口的吸收杯内放入二氧化碳吸收剂(氢氧化钠)，然后将培养瓶密封，置于生化培养箱内，当被测样品在20±1℃条件下恒温进行五日培养后，在一定的搅拌速度下，瓶内的水样进行生物氧化反应。有机物转变成氮、碳和硫的氧化物，并产生二氧化碳气体被氢氧化钠吸收，而培养瓶内上部空间的氧气不断地供给水样中微生物的需氧量，培养瓶内产生了压力差，通过检测玻璃管中汞的高度， 即可计算出水样在规定测定期间内的BOD值。